教学大纲介绍：
《生物技术药物实验》课程
（一）本课程实验总体介绍
1、本课程实验的任务：
生物制药技术是制药工程及药学专业的专业课之一，它内容覆盖了生物技术的许多研究领域，使学生得到生物技术实验操作的全程、全方面训练，以提高学生的学习兴趣、动手能力和工作的责任心。
生物技术药物这门课程通过讲授生物制药技术的基本概念，基本理论入手,使学生理解和掌握如何从基因表达出发,到生产出合格的药品的详细过程,有重点介绍胰岛素,细胞因子等的生产过程,增强学生的学习兴趣,培养学生的综和素质。
实验内容同时将过去简单的验证性实验转变为综合性、设计性实验，旨在实验中提高学生实验设计能力、分析问题、解决问题的能力以及实验数据的处理能力，从而培养和提高学生的实践能力和创新能力。还能大大提高学生对这些热门学科的兴趣，对提高学生的综合素质和创新能力具有重要的作用和意义。
2、本课程实验简介：
本实验课程是建立一个综合型和以研究性的大实验教学体系，重视各项技术的衔接，启迪学生的科学思维和创新意识，提高学生对实验方法和实验技术的综合运用能力。
3、本课程适用专业：
生物工程、药学、制药工程
4、本课程实验涉及核心知识点：
本实验课程以一个基因片段的获得，表达和纯化和活性分析为主线，抓住蛋白和核酸两大主题，建立一个综合型和研究性的大实验教学体系，重视各项技术的衔接，启迪学生的科学思维和创新意识，提高学生对实验方法和实验技术的综合运用能力。
5、本课程实验重点与难点：
质粒DNA提取、提取的质粒浓度检测、琼脂糖凝胶电泳
6、考核方式：
从多方面、多角度考查和评价学生的成绩，统筹考核实验过程与实验结果，激发学生实验兴趣，提高实验能力。实验课成绩从预习、实验及其报告、实验操作考试等多方面进行综合考核。并对其成绩考核做出的分配比是:平时的个人实验及操作占35%、实验结果占20%、实验报告占30%与最后的实验考试占15%。
7、总学时：
10学时
8、教材名称及教材性质：
自编实验资料
9、参考资料：
1.生物技术药物 马大龙主编 （863 生物高技术丛书）科学出版社
2．基因工程药物 李元主编 化学工业出版社
（二）包含实验项目基本信息
实验项目一
1、实验项目名称：
质粒DNA的提取 （3学时）
2、实验项目性质：
验证性
3、实验要求：
必修
4、计划学时数：
3学时
5、实验内容：
碱裂解法提取载体质粒DNA
6、项目需用仪器设备名称：
灭菌锅；冰箱；制冰机；旋涡混合仪；微量移液器；超净工作台；常温离心机；水浴锅；核酸电泳仪；紫外分光光度计
7、所需主要元器件及耗材：
LB液体培养基：1%蛋白胨，0.5%酵母提取物，1%NaCl，用NaOH调pH到7.2，121℃灭菌20min备用。固体LB培养基则在LB液体培养基中添加1.5%～2%琼脂，灭菌后备用；
含质粒的大肠杆菌菌株：如pBSSK/DH5α、pET28/BL21；
氨苄青霉素：母液100mg/ml，工作浓度100ug/ml；
溶液I：50mmol/L葡萄糖，25mmol/L Tris-Cl（pH 8.0），10mmol/L EDTA；
溶液II：0.2 mol/L NaOH，1% SDS；
溶液III：3mol/L醋酸钾用醋酸调到pH 4.8；
酚/氯仿/异戊醇：V/V=25:24:1；
NaAc：3mol/L，pH5.2；
TE：10mmol/L Tris-HCl（pH8.0），1mmol/L EDTA；
无水乙醇；70%乙醇；
RNaseA：10mg/ml。
进口琼脂糖 (agarose)：质量分数为0.8%～1.5%；
10×TBE缓冲液：108g Tris，55g硼酸，40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)，定容至1L。电泳时工作浓度为 0.5×TBE缓冲液；
溴化乙锭(ethidium bromide,EB)：贮存浓度为0.5mg/ml，工作浓度为0.5mg/L；
6×上样缓冲液：0.25%溴酚蓝，40%蔗糖，10mmol/L EDTA(pH8.0)，4℃保存；
λDNA/HindⅢ标准Marker。
8、实验项目目的和任务：
掌握最常用的提取和纯化质粒DNA的方法。
编写责任人：_________ 审核人：____________
编写时间：___年___月___日 审核时间：___年___月___日
实验项目二
1、实验项目名称：
紫外分光光度法测定DNA纯度和浓度 （3学时）
2、实验项目性质：
验证性
3、实验要求：
必修
4、计划学时数：
3学时
5、实验内容：
紫外分光光度计测定DNA纯度和浓度
6、项目需用仪器设备名称：
紫外分光光度计；微量移液器；烧杯；离心管。
7、所需主要元器件及耗材：
DNA样品溶液；H2O
8、实验项目目的和任务：
通过紫外分光光度计对DNA浓度和纯度的检测，进一步熟悉了解之外分光光度计的使用。
编写责任人：_________ 审核人：____________
编写时间：___年___月___日 审核时间：___年___月___日
实验项目三
1、实验项目名称：
琼脂糖凝胶电泳检测DNA （4学时）
2、实验项目性质：
验证性
3、实验要求：
必修
4、计划学时数：
4学时
5、实验内容：
配制电泳缓冲液，制备琼脂糖凝胶，点样，电泳。电泳检测提取得质粒 pUC118的纯度和构型，pUC118酶切后DNA分子量。
6、项目需用仪器设备名称：
核酸制胶装置；天平；微波炉；电泳仪；微量移液器；凝胶成像系统；手套；封口膜；锥形瓶；制冰机；pH计
7、所需主要元器件及耗材：
（1）5×TBE：54gTris;27.5g硼酸；EDTA（0.5mol/L，pH8.0）20ml，加水至1L，用前稀释10倍
（2）溴化乙锭（EB）：0.5mg/ml溶液，工作浓度为0.5mg/L，即使用前稀释1000倍。
（3）6×上样缓冲液：0.25%溴酚蓝，40%蔗糖，10mmol/L EDTA(pH8.0)，4℃保存；
（4）λDNA/HindⅢ标准Marker。
8、实验项目目的和任务：
（1）通过学习水平式琼脂糖凝胶电泳检测DNA，掌握水平式凝胶电泳技术。
（2）通过测定提取到的染色体DNA或质粒DNA的纯度和浓度，为进一步的酶切、连接及转化条件的选择提供依据。
编写责任人：_________ 审核人：____________
编写时间：___年___月___日 审核时间：___年___月___日
