《分子生物学实验》教学大纲

课程代码：05197280

课程名称：分子生物学实验

课程学分：1.0                           课程学时：16

课程性质：专业限选课                    课程归属：科学素养类

开课部门：生物工程学院                  建议修读学期：第六学期

适用对象：生物工程专业、药学专业、生物制药专业、生物技术专业等大学本科生

«     课程概况

n        教学目的

使学生从分子生物学课堂的理论学习过渡到具体的实验操作上，从而由抽象的课堂理论到鲜活的实际应用，不仅增强学生对基础理论的认知，而且提高学生对该门学科的兴趣，进而掌握该门课程的基本的实验研究方法，为以后的研究生学习和科研工作打下坚实的基础。

n        课程地位

分子生物学实验为生物类（包括生物科学、生物技术、生物工程、药学等）各专业的专业基础性实验。在生物化学、遗传学等先修课程体系下，再学习本课程，有助于学生的理解和掌握。通过本课程的学习，利于后续如基因工程、细胞工程、酶工程、生物技术、分子遗传学等实验的学习和理解。分子生物学实验课程是生命科学领域中最基本的通用性实验技术，在生命科学领域中占有重要地位。

n        学时分配

«     教学内容及要求

n        1. 试剂盒小量提取质粒DNA

u       实验目的和要求

（1）      通过实验使学生从抽象的理论认识到亲眼目睹质粒DNA的外观形状，进而

从感性认识上理解质粒DNA究竟是什么；

         （2）掌握使用试剂盒从菌体中提取质粒的方法，并懂得相关原理；

         （3）学会正确使用相关仪器设备。

u       主要实验方法

（1）       使用微量移液器移取相关试剂

（2）       利用高速台式离心机离取相关样品

（3）       DNA的保存

n        2. 质粒酶切和鉴定

u       实验目的和要求

（1）了解酶切原理；

（2）掌握酶切体系的建立原则；

（3）熟悉EcoR I酶的特点，进而学习其它基因工程限制性核酸内切酶的特点。

u       主要实验方法

（1）       利用微量移液器加样

（2）       37℃恒温水浴锅的使用

n        3. 聚合酶链反应——PCR

u       实验目的和要求

（1）掌握PCR技术的原理和操作方法；

         （2）从实践中充分懂得基因的体外扩增方法，及PCR体系中各成分的设计要求；

         （3）了解PCR技术的实际应用意义。

u       主要实验方法

（1）       微量移液器加样

（2）       PCR仪的使用

n        4. 核酸的琼脂糖凝胶电泳

u       实验目的和要求

（1）掌握核酸电泳的原理和方法；

（2）了解琼脂糖浓度、质粒DNA大小等因素对电泳迁移率的影响；

（3）学习利用Marker初步估算质粒DNA分子的大小。

u       主要实验方法

（1）       琼脂糖凝胶的配制

（2）       电泳缓冲液的配制

（3）       样品加样和电泳

（4）       凝胶电泳扫描仪的使用

«     课程考核

n        考核方式（考查）

n        考核形式（试卷/实验报告）

n        成绩评定（详细说明课程成绩的记分制、构成比例）

百分记分制，平时的实验报告成绩60%，实验理论考核30%，实验操作10%。

«     教学材料

n        教材

u       《分子生物学实验讲义》

n        主要参考资料

u       《分子生物学实验讲义》，自编讲义。

u        魏春红、李毅主编《现代分子生物学实验技术》.高等教育出版社.2006

u        J.Sambrook；E.F.Fritsch；T.Maniatis 著 金冬雁等译 侯云德等校.第二版《分子克隆·实验指南》.科学出版社.1996

          撰写人：邱爱东                             审核人：郭晓强